アミノ酸分析の間、タンパク質とペプチドはそれらの構成アミノ酸に加水分解され、それは次にHPLCによって分離され、UVまたは蛍光分析によって検出され、定量されます. アミノ酸分析を使用してタンパク質やペプチドに結合していないが血清、髄液、細胞などの生体組織に自由に存在する遊離アミノ酸を測定する場合、加水分解は使用されません。. 通常、高分子量のタンパク質やペプチドはフィルターによってマトリックスから除去されます。. しかしながら、このアッセイはペプチドおよびタンパク質には盲目であり、遊離アミノ酸のみが誘導体化されてクロマトグラムの作業部分に見られる。. 新しい技術はアッセイの規模を縮小することを可能にし、そしてこのアッセイの有用性を大幅に増大させる、より高い感度およびより少ない豊富なサンプルの分析を可能にする。. このアッセイは、主にタンパク質およびペプチドの定量におけるゴールドスタンダードとして使用されています。. ブラッドフォードおよび他の比色アッセイは実施が容易であり、そして多くの機器を必要としない。. 比色アッセイは、同じタンパク質を繰り返し使用している場合は、アミノ酸分析標準に合わせて調整できます。. 各残基のモルパーセントは、既知の配列からの予想パーセントと比較することができる。. いくつかのデータベース検索は、アミノ酸分析によって決定されたタンパク質のパーセント組成から行うことができます。. しかし、エドマンケミストリーとマススペクトロメトリーははるかに選択的で、信頼限界が高いため、タンパク質同定に最適な分析です。. 私たちの研究室でこのサービスを利用する多くの過去および現在のプロジェクトのほんの一部は以下の通りです。 容易に精製することができず、質量分析法と適合しないMAPSペプチドの認定 樹脂配合量の決定 ナノ粒子への薬物負荷の決定 ジペプチドライブラリーの加水分解における酵素的有効性の速度の測定 培地中のアミノ酸の経時的変化を測定する マーカーアミノ酸の蓄積の測定.
0 Comments
Leave a Reply. |
AuthorWrite something about yourself. No need to be fancy, just an overview. Archives
May 2019
Categories |